世和学术 | NGS揭示新发CD5+弥漫大B细胞淋巴瘤基因组特征和遗传分型

导语

弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是一组具有高度侵袭性和异质性的非霍奇金淋巴瘤（NHL）。CD5阳性（CD5+）DLBCL是DLBCL的独立亚组，占DLBCL的5%-10%，表现出侵袭性的临床过程，在以利妥昔单抗为基础的免疫化疗时代，患者5年总生存率（OS）仅为40%^[1]。探索CD5+ DLBCL的临床病理和分子特征将有助于更加精准地预后分层，指导临床个体化治疗。

徐州医科大学附属医院桑威教授团队与世和基因合作，采用世和血默胜™大Panel检测，分析CD5+ DLBCL和CD5- DLBCL的基因突变特征与遗传分型，结合临床病理指导精准预后分层。该研究成果已发表于American Journal of Surgical Pathology（IF=6.298）。

研究亮点

1、结合临床与NGS测序，探究了CD5+ DLBCL这一少见淋巴瘤类型的临床病理与基因组特征；

2、基于COO分型和遗传亚型分析揭示了CD5+ DLBCL富集ABC型和MCD亚型，可能提示CD5+ DLBCL对BTK抑制剂敏感；

3、更精细化的分子分型可能为CD5+ DLBCL提供一个精确的风险分层系统。

研究内容

该研究回顾性纳入了61例CD5+ DLBCL和60例CD5- DLBCL患者，对比分析了细胞形态、病理特征、常见临床预后标志物的表达差异以及细胞起源（COO）分型。同时对47例患者（24例CD5+ DLBCL，23例CD5- DLBCL）的组织样本进行世和血默胜™大Panel检测，分析突变图谱及遗传亚型，结合MYC/BCL-2、BCL-6、p53分子生物标志物探究精准的预后分层。

研究结果

61名CD5+ DLBCL患者和60名CD5- DLBCL患者被纳入分析。与CD5- DLBCL患者相比，年龄较大、晚期（III/IV）、低蛋白血症、中枢神经系统受累的发生率较高，以及国际预后指数（IPI）评分较高等临床特征在CD5+ DLBCL中明显更普遍（p<0.05）。细胞形态学与病理特征分析发现，CD5+ DLBCL和CD5- DLBCL无法通过形态学区分，但是MYC表达、MYC和BCL-2共同表达、p53表达水平在CD5+ DLBCL中相对更常见。相反，BCL-6表达水平在CD5- DLBCL中更常见（表1）。

表1. 入组患者临床病理学特征

DLBCL的细胞起源（COO）分型主要基于基因表达差异，将DLBCL分为生发中心B细胞样亚型（GCB亚型）、活化B细胞样亚型（ABC亚型）以及无法分类的第三种类型。目前临床采用替代的IHC算法进行COO分型，最常用的是Hans分类，可以分为GCB型和non-GCB型，是临床中广泛认可的预后模型。本研究分别采用IHC和基因表达2种方式对CD5+ DLBCL和CD5- DLBCL进行COO分型分析，IHC分型结果中non-GCB型的比例在CD5+ DLBCL队列中明显高于CD5- DLBCL队列（63.9% vs. 30.0%，p<0.001）；使用Lymph2Cx检测法对55份DLBCL样本进行COO分型，ABC亚型在CD5+ DLBCL中比CD5- DLBCL中更常见（63.0% vs 35.7%，p=0.043）（图1）。

图1. Lymph2Cx基因表达检测（NanoString）分析CD5+ DLBCL和CD5- DLBCL的COO分型

本研究对24例CD5+ DLBCL样本和23例CD5- DLBCL样本进行逾400个血液淋巴系统肿瘤相关基因的靶向NGS测序分析，突变特征分析，发现CDKN2A缺失和MYD88、PIM1和KMT2D突变在CD5+ DLBCL样本中显著富集，DUSP2、TET2突变和BCL6基因融合在CD5- DLBCL样本中显著富集（p<0.05，图2）。

图2. CD5+和CD5− DLBCL基因突变特征

根据Schmitz等人^[2]建立的DLBCL基因亚型分析（四分型），与CD5− DLBCL相比，CD5+ DLBCL中MCD亚型的比例更高（54.2% vs.13.0%，p=0.005）（图3）

图3. CD5+ DLBCL和CD5− DLBCL遗传亚型分布

本研究评估了目前临床中常见的几项预后标志物（COO分型、MYC/BCL-2共表达、BCL6表达与p53表达）在CD5+ DLBCL中预后分层的意义。与CD5- DLBCL相比，COO分型（图4A）、MYC/BCL-2是否共表达（图4B）、BCL6（图4C）和p53（图4D）的表达状态对CD5+ DLBCL的OS和PFS都没有显著影响。

图4. CD5+ DLBCL和CD5- DLBCL中COO分型和常见淋巴生物标志物的预后意义

结语

新发CD5+ DLBCL是一类具有特异临床特征及复杂分子学改变的淋巴瘤。本研究应用世和基因血癌检测大Panel血默胜™，全面揭示了CD5+ DLBCL独特的基因组突变特征和遗传亚型，表现出与ABC亚型和MCD亚型相似的遗传特征，提示联合BTK抑制剂可能是精准治疗更优方案，未来更精细化的分子分型将为CD5+ DLBCL提供一个精确的风险分层系统。